Kei roto i te wea o te nakahi he whākōkī hei whakamaroke i ngā here hākawa carboxyl.Ko nga taputapu mo te hydrolysis he phospholipids, acetylcholine me te acetate kakara.E toru nga momo o enei enzyme: phospholipase, acetylcholinesterase me te aromatic esterase.Arginine esterase i roto i te nakahi weriweri ka taea hoki te waiarginine waihanga lysine ranei, engari te nuinga hydrolyzes here pūmua peptide i roto i te natura, no reira no te protease.Ko nga enzyme e korerohia ana i konei ka mahi anake i runga i nga taputapu haukawa, kaore e taea te mahi i runga i tetahi here peptide.I roto i enei enzymes, ko nga mahi koiora o te acetylcholinesterase me te phospholipase he mea nui ake, kua tino akohia.Ko etahi o nga weriweri nakahi he kaha nga mahi esterase kakara, ka taea te whakamaarama i te p-nitrophenyl ethyl ester, a – P-naphthalene acetate me te indole ethyl ester.Kare tonu i te mohio mena he mea hanga tenei ngohe e te whaakiki motuhake, he huanga taha mohio ranei o te carboxylesterase, waihoki tona hiranga koiora.I te tauhohenga o te ware o Agkistrodon halys Japonicus ki te p-nitrophenyl ethyl ester me te indole ethyl ester, kaore i kitea nga hydrolysates o te p-nitrophenol me te indole phenol;Engari, ki te tauhohe enei esters ki te cobra Zhoushan subspecies snake ware me te Bungarus multicinctus snake venous, ka tere te hauwai.E mohiotia ana he kaha te mahi cholinesterase enei ngongo cobra, tera pea te kawenga mo te hauwai o nga taputapu o runga ake nei.Ko te tikanga, ko Mclean et al.(1971) i kii mai he maha nga wea nakahi no te whanau Cobra ka taea te hauwai indole ethyl ester, naphthalene ethyl ester me te butyl naphthalene ester.I ahu mai enei ware nakahi: cobra, pango kaki cobra, pango ngongo ngongo, koura cobra, Egyptian cobra, king cobra, koura cobra mamba, pango pango me te mamba ngutu ma (D. aw kei te mohio tonu ki te rawhiti rhombola rattlesnake
Ka taea e te weriweri nakahi te whakamaarama i te methyl indole ethyl ester, koinei te taputapu mo te whakatau i te mahi cholinesterase i roto i te serum, engari kaore tenei wahangu nakahi e whakaatu ana i te mahi cholinesterase.E whakaatu ana tenei he esterase e kore e mohiotia i roto i te paihana cobra, he rereke ki te cholinesterase.Kia mohio ai koe ki te ahua o tenei enzyme, me mahi ano te wehenga.
1, Phospholipase A2
(I) Tirohanga
Ko te Phospholipase he whākōkī ka taea te whakamaroke i te glyceryl phosphate.E 5 nga momo phospholipase kei roto i te taiao, ko te phospholipase A2 me te phospholipase.
A. , phospholipase B, phospholipase C me te phospholipase D. Ko te nui o te waiu o te nakahi he phospholipase A2 (PLA2), he iti noa nga huu nakahi kei roto i te phospholipase B, me etahi atu phospholipase kei te nuinga o nga mea kei roto i nga kopa kararehe me nga huakita.Ko te pikitia 3-11-4 e whakaatu ana i te waahi mahi o enei phospholipases i runga i te hauwai o te tïpako.
I roto i nga phospholipases, kua nui ake te ako a PLA2.Koinei pea te pūmua e tino rangahauhia ana i roto i te wahangu nakahi.Ko tana tïpako ko te here ester i te tuunga tuarua o Sn-3-glycerophosphate.Kei te kitea nuitia tenei enzyme i roto i te waiu nakahi, i te pi, i te paihana kopiona me nga kopa kararehe, a, he nui te PLA2 i roto i nga huu nakahi whanau e wha.Na te mea ka pakaruhia e tenei enzyme nga toto toto whero ka puta te hemolysis, ka kiia hoki ko "hemolysin".Ko etahi ka kiia ko te PLA2 hemolytic lecithinase.
I kitea tuatahitia e Ludeeke ka taea e te nakahi te hanga i te puhui hemolytic ma te mahi i te lecithin na roto i nga whākōkī.I muri mai, Delezenne et al.I whakamatauria e te wa e mahi ana te wea cobra ki runga i te serum hoiho, te toene ranei, ka hanga he matū hemolytic.Kei te mohiohia inaianei ka taea e te PLA2 te mahi tika i runga i nga phospholipids o te membrane erythrocyte, te whakangaro i te hanganga o te erythrocyte membrane me te whakaheke tika;Ka taea hoki te mahi i runga i te serum, i te taapiri ranei i te lecithin hei whakaputa i te lecithin hemolytic, e mahi ana ki nga toto toto whero hei whakaputa i te hemolysis autaki.Ahakoa te nui o te PLA2 i roto i nga whanau e wha o te nakahi, he rereke te ahua o nga enzymes i roto i nga momo momo nakahi.Te nakahi (C
Ko te wea nakahi i whakaatu he ngoikore te mahi PLA2.Ko te Ripanga 3-11-11 e whakaatu ana i te whakatairitetanga o te mahi PLA2 o te 10 nui o nga weriweri o nga nakahi paihana i Haina.
Ripanga 3-11-11 Whakatauritenga o nga mahi phospholipase VIII o te 10 ngangau nakahi i Haina.
Te nakahi
Te tuku ngako
waikawa aliphatic,
Cjumol/mg)
Mahi Hemolytic CHU50/^ g * ml)
Te nakahi
Tukua nga waikawa ngako
(^raol/mg)
Mahi hemolytic “(HU50/ftg * 1111)
Najanaja atra
9. 62
tekau ma tahi
Micracephal ophis
rima ira kotahi kore
kalyspallas
8. 68
e rua mano e waru rau
gracilis
V, acutus
7. 56
***
Ophiophagus hannah
toru ira waru rua
kotahi rau e wha tekau
Bnugarus fasctatus
7,56
e rua rau e waru tekau
B. multicinctus
kotahi ira iwa ono
e rua rau e waru tekau
Viper a russelli
whitu ira kore toru
T, mucrosquamatus
kotahi ira waru rima
Siamensis
T. stejnegeri
0. 97
（2） Te wehewehe me te purenga
He nui te ihirangi o te PLA2 i roto i te waiu nakahi, a he pumau ki te wera, te waikawa, te alkali me te denaturant, kia ngawari ai te pure me te wehe i te PLA2.Ko te tikanga noa ko te mahi tuatahi ki te tarai i te kiri ki runga i te weriweri, katahi ka whakahaere i te chromatography whakawhiti katote, ka taea te mahi ano.Me tohu ko te whakamaroke whakatio o te PLA2 i muri i te chromatography whakawhiti katote kia kaua e whakahiato, na te mea ko te whakamaroke whakamaroke-tio ka piki ake te kaha o te katote i roto i te punaha, he take nui e whakahiato ai te PLA2.I tua atu i nga tikanga whaanui i runga ake nei, ko nga tikanga e whai ake nei kua whakamahia ano: ① Wells et al.② Ko te tairitenga o te tïpako o PLA2 i whakamahia hei here mo te chromatography affinity.Ka taea e tenei ligand te here ki te PLA2 i roto i te waahana nakahi me te Ca2+.Ko te EDTA te nuinga o te waa e whakamahia ana hei maamaa.I muri i te tangohanga o Ca2+, ka heke te hononga i waenga i te PLA2 me te ligand, ka taea te wehe mai i te ligand.Ko etahi e whakamahi ana i te 30% wairewa pararopi, 6mol/L Urea ranei hei whakamaarama.③ I mahia te chromatography Hydrophobic me te PheiiylSephar0SeCL-4B hei tango i te tohu PLA2 i te cardiotoxin.④ I whakamahia te antibody anti PLA2 hei ligand ki te mahi chromatography affinity ki PLA2.
I tenei wa, kua purea te tini o nga nakahi PLAZ.Tu et al.(1977) kua whakarārangihia te PLA2 kua purea mai i te wahangu nakahi i mua i te tau 1975. I nga tau tata nei, he maha nga korero mo te wehenga me te purenga o te PLA2 kua panuitia ia tau.I konei, ka arotahi matou ki te wehenga me te purenga o te PLA e nga tohunga Hainamana.
Chen Yuancong et al.(1981) i wehea nga momo PLA2 e toru mai i te paihana o Agkistrodon halys Pallas i Zhejiang, ka taea te wehea ki te PLA2 waikawa, koretake me te kawakore kia rite ki o raatau tohu tohu.E ai ki tona paitini, he paitini ake te PLA2 kupapa, kua tohuhia ko Agkistrodotoxin presynaptic neurotoxin.Ko te PLA2 kawakore he iti ake te paitini, me te PLA2 waikawa karekau he paitini.Wu Xiangfu et al.(1984) i whakatairitehia nga ahuatanga o nga PLA2 e toru, tae atu ki te taumaha ngota, te hanganga waikawa amino, te N-terminal, te ira isoelectric, te pumau waiariki, te mahi enzyme, te paitini me te mahi hemolytic.I kitea e nga hua he rite te taumaha o te ngota ngota me te pumau o te waiariki, engari he nui nga rereketanga o etahi atu waahanga.I te taha o te ngohe ngohe, he nui ake te ngohe o te whaariki waikawa i te ngohe o te enzyme alkaline;Ko te awenga hemolytic o te enzyme alkaline ki runga i nga toto toto whero kiore te mea tino kaha, whai muri ko te whaakini kore, me te waikawa waikawa kare e hemolyzed.Na reira, ka whakaarohia ko te paanga hemolytic o te PLAZ e pa ana ki te utu o te ngota ngota PLA2.Zhang Jingkang et al.(1981) kua hanga tioata Agkistrodotoxin.Tu Guangliang et al.(1983) i kii ko te PLA paitini me te ira isoelectric o 7. 6 i wehea ka purea mai i te paihana o Vipera rotundus mai i Fujian, me ona ahuatanga tinana me te matū, te hanganga waikawa amino me te raupapa o nga toenga waikawa amino 22 i te N. -i whakatauhia te mutunga.Li Yuesheng et al.(1985) i wehe, i purea tetahi atu PLA2 mai i te paihana o Viper rotundus i Fujian.Ko te waahanga iti o te PLA2 * he 13 800, ko te ira isoelectric ko 10.4, ko te mahi motuhake ko te 35/xnioI/miri mg。 Ma te lecithin hei tïpako, ko te pH tino pai o te enzyme ko te 8.0 me te 65 ° C te pāmahana tino pai. LD5 i werohia ki roto ki nga kiore.Ko te 0.5 ± 0.12mg/kg.Ka kitea e tenei enzyme he hua anticoagulant me te hemolytic.Ko te ngota ngota PLA2 paitini he 123 nga toenga o te 18 momo waikawa amino.He taonga nui te ngota ngota i te cysteine (14), te waikawa aspartic (14) me te glycine (12), engari kotahi anake te methionine, ko tana pito-N he toenga serine.Ka whakatauritea ki te PLA2 i wehea e Tuguang, he tino rite te taumaha ngota me te maha o nga toenga waikawa amino o nga isoenzymes e rua, he tino rite ano te hanganga waikawa amino, engari he ahua rereke te maha o te waikawa aspartic me te toenga proline.Guangxi king cobra snake venom kei roto PLA2 taonga.Shu Yuyan et al.(1989) i wehea he PLA2 mai i te weriweri, he mahi motuhake e 3.6 nga wa teitei ake i te weriweri taketake, he taumaha ngota o te 13000, he hanganga o nga toenga waikawa amino 122, he tohu isoelectric o 8.9, me te pai o te waiariki.Mai i te karu hiko irahiko mataki i te paanga o te PLA2 taketake i runga i nga toto toto whero, ka kitea he tino paanga ki runga i te kiriuhi toto toto whero o te tangata, engari karekau he paanga ki nga toto toto whero koati.Ko tenei PLA2 he kaha whakamuri ki te tere hiko o nga toto toto whero i roto i te tangata, koati, rapeti me nga poaka guinea.Chen et al.Ka taea e tenei enzyme te aukati i te whakahiato pereti na te ADP, te collagen me te waikawa arachidonic konutai.Ina 10/xg/ml~lOOjug/ml te kukū o te PLA2, ka tino aukatihia te whakahiato pereti.Mena ka whakamahia nga pereti kua horoia hei rauemi, kaore e taea e PLA2 te aukati i te whakahiato i te kukū o te 20Mg/ml.Ko te Aspirin he aukati o te cyclooxygenase, ka taea te aukati i te paanga o te PLA2 ki nga pereti.Ka taea e te PLA2 te aukati i te whakahiato pereti ma te whakamaarama i te waikawa arachidonic hei whakahiato i te thromboxane A2.Ko te ahua o te otinga o te PLA2 i hangaia e Agkistrodon halys Pallas venom i te Porowini o Zhejiang i akohia e te dichroism porowhita, te korikori me te whakauru UV.Ko nga hua whakamatautau i whakaatu ko te ahua o te mekameka matua o tenei whaakiki he rite ki te ahua o te whaariki mai i etahi atu momo me nga puninga, he pai te whakamahana o te anga o te anga, me te whakarereketanga o te hanganga o te taiao waikawa ka huri.Ko te huinga o te activator Ca2+ me te enzyme kaore e pa ki te taiao o nga toenga tryptophan, i te mea ko te aukati Zn2+ ka mahi i te ritenga.He rereke te ahua o te uara pH o te otinga ki te mahi o te whaariki i nga reagents o runga ake nei.
I roto i te tukanga o te purenga PLA2 o te wahangu nakahi, he mea tino kitea ko te wahangu nakahi kei roto e rua, neke atu ranei nga tihi elution PLA2.Ka taea te whakamarama i tenei ahuatanga e whai ake nei: ① na te noho o nga isozymes;② Ko tetahi momo PLA2 he mea polymerized ki roto i nga momo ranunga PLA2 me nga momo taumahatanga ngota, ko te nuinga kei te awhe 9 000~40 000;③ Ko te whakakotahitanga o te PLA2 me etahi atu waahanga huu nakahi ka whakararu i te PLA2;④ Na te mea ko te here amide i roto i te PLA2 ka hauwai, ka huri te utu.① Me te ② he mea noa, he iti noa nga tuunga, penei i te PLA2 i roto i te CrWa/w te nakahi.
E rua nga ahuatanga: ① me ②.Ko te tuatoru o nga ahuatanga kua kitea i roto i te PLA2 i roto i te paihana o nga nakahi e whai ake nei: Oxyranus scutellatus, Parademansia microlepidota, Bothrops a ^>er, Viper Palestinian, waikiri onepu, me te nakahi kino km.
Ko te hua o te keehi ④ ka huri te tere o te heke o te PLA2 i te wa o te electrophoresis, engari kaore e rereke te hanganga waikawa amino.Ka pakaruhia nga peptide ma te hauwai, engari i te nuinga o te waa ka herea tonu e nga here disulfide.E rua nga momo PLA2 kei roto i te ware o te poka rattlesnake ki te rawhiti, ko te momo a me te momo p PLA2.Ko te rereketanga i waenganui i enei momo PLA2 e rua he waikawa amino kotahi, ara, ko te glutamine i roto i tetahi ngota ngota PLA2 ka whakakapihia e te waikawa glutamic i tetahi atu ngota ngota PLA2.Ahakoa kaore i te marama te take tika mo tenei rereketanga, e whakaponohia ana e pa ana ki te whakakorenga o te PLA2.Mena ka whakamahanahia te PLA2 i roto i te weriweri Pirihitia ki te werawera, ko nga roopu mutunga i roto i ona ngota ngota ngota ka nui ake i mua.Mai i te C PLA2 kua wehea mai i te weriweri nakahi, e rua nga momo momo N-terminal, ko tona taumahatanga ngota ko te 30000. Ko tenei ahuatanga ka puta mai pea i te riima hangarite o PLA2, he rite ki te dimer hangarite i hangaia e te PLA2 i roto i te ware o te rattlesnake taimana taimana ki te rawhiti. me te nakahi taimana tuara ki te hauauru.He maha nga momo iti o te cobra Ahia, ko etahi kaore i te tino marama ki te whakarōpūtanga.Hei tauira, ko te mea i kiia i mua ko te Cobra Outer Caspian subspecies kua mohiotia inaianei
Me kii ki te Outer Caspian Sea Cobra.I te mea he maha nga momo iti me te whakakotahi, he rereke te hanganga o te wea nakahi na runga i nga punaa rereke, he nui hoki nga ihirangi o nga isozymes PLA2.Hei tauira, he weawa cobra
Neke atu i te 9 nga momo isozymes PLA2 o nga momo r ^ ll i kitea i roto, e 7 nga momo isozymes PLA2 i kitea i roto i te paihana o nga momo iti o Caspian.Durkin et al.(1981) i akohia te ihirangi PLA2 me te maha o nga isozymes i roto i nga momo weriweri nakahi, tae atu ki te 18 nga waapa cobra, e 3 nga wahana mamba, e 5 nga waapa waikura, e 16 nga wahana nakahi, e 3 nga wahana nakahi moana.I te nuinga o te waa, he nui te mahi a te PLA2 o te waapa cobra, me te maha o nga isozymes.Ko te ngohe PLA2 me nga isozymes o te viper venom he reo.He iti rawa te mahi PLA2 o te mamba venom me te rattlesnake venom, kaore ranei he mahi PLA2.He iti hoki te mahi PLA2 o te nakahi o te moana.
I nga tau kua pahure ake nei, kaore i te korerohia ko te PLA2 i roto i te waahana nakahi kei roto i te ahua o te dimer kaha, penei i te rhombophora rattlesnake ki te rawhiti (C. snake venom kei roto te momo a me te momo P PLA2, e rua nga waahanga o nga waahanga rite e rua. , a ko te dimerase anake kei a ia
Mahi.Shen et al.i whakaaro ano hoki ko te dimer o te PLA2 o te wea nakahi te ahua kaha o te enzyme.Ko te rangahau mo te hanganga mokowhiti e whakaatu ana ko te PLA2 o te nakahi taimana tuara o te hauauru kei te ahua o te dimer.Pūhui piscivorous
E rua nga momo PLA ^ Ei me E2 o te weriweri nakahi, kei te noho a 仏 i te ahua o te dimer, kei te kaha te dimer, kei te hohe tonu tana monomer wehe.Lu Yinghua et al.(1980) i ako ano i nga ahuatanga o te tinana me te matū me nga kinetics tauhohenga o E. Jayanthi et al.(1989) i wehea he PLA2 taketake (VRVPL-V) mai i te weriweri.Ko te taumaha ngota o te monomer PLA2 he 10000, he mate whakamate, he anticoagulant me te edema.Ka taea e te enzyme te polymerize polymer ki nga taumahatanga ngota rereke i raro i te ahua o te PH 4.8, ka piki ake te tohu o te polymerization me te taumaha ngota o nga polymers me te piki o te pāmahana.Ko te taumaha ngota o te polymer i hangaia i te 96 ° C he 53 100, a ko te mahi PLA2 o tenei waerau ka piki ma te rua
Te wa tuku: Noema-18-2022